ADN recombinante artificial en hipotiroidismo congénito (HC) 

Mutaciones en PAX 8 las cuales se asocian con disgenesia tiroidea causante de (HC) mediante la secuenciación  de las regiones codificantes en ADN genómico, para esto se utilizó  ensayos de transfección celular que utilizan varias construcciones de vectores y mutagénesis inducida, además de movilidad electroforética para investigar los efectos de mutaciones seleccionadas (D94N y G41V) en las actividades de transcripción y unión de PAX8 en los promotores de genes diana para TG y TPO. (1)

• T: Identificación y caracterización de nuevas mutaciones de PAX8 en hipotiroidismo congénito
• O: Identificar y caracterizar las mutaciones de PAX8 en clones recombinantes
• G: PAX 8;  La secuencia codificante completa se amplifico por RT-PCR
• ER:  KpnI y XbaI
• EL: No especifica 
• V:  pCDNA3.1(plásmido);
• C R: Células eucariotas - células HeLa
• M T G: Transfección por lipofección 
• M I C:  
• Métodos moleculares:
• PCR, secuenciación 
• Métodos microbiológicos:
• Cultivo de células en DMEN suplementado con penicilina-estreptomicina 
• Metidos bioquímicos:
• Movilidad electroforética (EMSA) 

Recombinación de ácidos nucleicos en la naturaleza 

Un ejemplo de recombinación de AN en la naturaleza sucede en las organismos unicelulares procariontes (bacterias), que consiste en la integración del ADN del donante en el cromosoma receptor mediante recombinación esto se da entre células bacterianas y mediante de tres mecanismos:

• Conjugación:  Proceso de transferencia génica desde una célula donadora a otra receptora, que se realiza por medio de los plásmidos, que es un tipo de ADN circular extracromosomal autoreplicante y se requiere de contacto directo entre genes.
• Transformación: en la que una bacteria incorpora segmentos de ADN de bacterias lisada
• Transducción: Involucra  la transferencia de segmentos de DNA de una bacteria a otra, pero mediada por virus bacterianos (bacteriófagos).(2)

Bibliografia: 

1. Liu S, Wang X, Zou H, Ge Y, Wang F, Wang Y, et al. Identification and characterization of novel PAX8 mutations in Congenital Hypothyroidism(CH) in a Chinese population. Oncotarget [Internet]. 2017 Jan 2 [cited 2021 Feb 8];8(5):8707–16. Available from: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC5352434/

2. Espinola F. Tras la pista de los replicadores: la transferencia de genes en la naturaleza [Internet]. CICY. 2018 [citado 7 febrero 2021]. Disponible en: https://uceedu-my.sharepoint.com/:b:/g/personal/amnaranjol_uce_edu_ec/EWBDJI1qDsZLgW8pyQHRk9MBBKNXQJ25hMAW5lcMcUtUbQ?e=MKS4fQ

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