Alexander Naranjo
Tercer semestre (Paralelo P5)
La salud no lo es todo pero sin ella, todo lo dem谩s es nada.
mi茅rcoles, 12 de octubre de 2022
domingo, 7 de marzo de 2021
Terapia Epigen贸mica en Hipotiroidismo
Tema: Uso de valproato (vpa) como inhibidor de histonas desacetilasa (HDAC) el cual bloquea significativamente los efectos delet茅reos del hipotiroidismo terap茅utico
Mecanismo Epigen贸mico trata: Inhibici贸n de histonas desacetilasa
¿C贸mo se lo hizo?:
- Dado que las HDAC est谩n asociadas con los correpresores unidos a los receptores de hormonas tiroideas (TR) sin ligando, se forman los complejos correpresores NCoR (correpresor del receptor nuclear) junto con la histona desacetilasa, lo cual provoca desacetilacion de histonas en la regiones de ADN que rodean la cromatina, lo cual conduce a la represi贸n de la transcripci贸n basal (disminuci贸n ARN pol II y factores de transcripci贸n),.
- Cuando se da la inhibici贸n de la actividad de HDAC bloquea la regulaci贸n negativa de los genes diana por los TR sin ligando y puede restaurar el desarrollo normal del cerebro bajo hipotiroidismo.
Resultados:
- Se analiz贸 la acetilaci贸n de H3K9, al administrar valproato y se encontr贸 que la disminuci贸n de la acetilaci贸n total y espec铆fica de K9 de la histona H3 bajo hipotiroidismo se restableci贸 considerablemente, adem谩s el hipotiroidismo aument贸 significativamente la actividad de HDAC total en el cerebelo en desarrollo y la administraci贸n de VPA atenu贸 este efecto a pesar del estado hipotiroideo inalterado.
- Se evidenci贸 la recuperaci贸n de genes diana de la hormona tiroidea como Bdnf , Pcp2 y Mbp , as铆 como estructura dendr铆tica mejorada de neuronas de Purkinje.
Bibliografia:
1.Kumar P, Chagtoo M, Godbole MM. Histone deacetylase inhibition reduces hypothyroidism-induced neurodevelopmental defects in rats. Journal of Endocrinology [Internet]. 2015 Nov [cited 2021 Mar 8];227(2):83–92. Available from: https://joe.bioscientifica.com/view/journals/joe/227/2/83.xml
domingo, 28 de febrero de 2021
- Tipo de edici贸n: Ex vivo (in vitro) - Germinal
- Dirigido hacia: ADN
- Dirigido por: CRISPR/Cas9
- Vectores: se insert贸 un fragmento de ADN de 20 mer (longitud de cebador) en los sitios de restricci贸n de pX330 con el pl谩smido Addgene
- 脫rgano a tratar: Tejido oseo, tejido nervioso, Tejido muscular (musculo cardiaco) y epitelio intestinal
- V铆a de administraci贸n: No especifica. (microinyecci贸n en ovocitos)
- Resultados:
- Cabe destacar que este estudio tuvo el objetivo de modelar casos humanos espor谩dicos de una enfermedad gen茅tica en ratones para abordar la relaci贸n causal entre una mutaci贸n y un fenotipo 煤nico, a consecuencia fenot铆pica de la TR a 1 N359Y mutaci贸n sin sentido presente en un solo paciente
- Las mutaciones generadas por CRISPR / Cas9 del gen Thra (Receptor alfa de Hormona tiroidea) provoc贸 alteraciones fenot铆picas similares a las reportadas en pacientes humanos: deterioro del crecimiento esquel茅tico, alteraciones leves del neurodesarrollo, tendencia a la anemia y reducci贸n del cociente T4 / T3.
s谩bado, 20 de febrero de 2021
Terapia con Stem Cells en Hipotiroidismo
Las c茅lulas madre del limbo de tipo fibroblasto humano (f-LSC) han adquirido un gran inter茅s como una herramienta potencial para lograr la inmunotolerancia debido a su “privilegio inmune natural” y propiedades inmunorreguladoras, en este caso se lo a utilizado en la tiroiditis de Hashimoto (TH) ya que es una enfermedad autoinmune tiroidea en donde existe infiltraci贸n de c茅lulas T citot贸xicas, la presencia de autoanticuerpos y la inducci贸n de Fas por citocinas que. destruyen el par茅nquima tiroideo y por lo cual es causa de hipotiroidismo.
Tipo de Stem Cell: Stem cell mesenquimales: c茅lulas madre del limbo de tipo fibroblasto humano
M茅todo de obtenci贸n:
- Aislamiento de c茅lulas madre limbares comenz贸 con una disecci贸n en la conjuntiva del ojo, detr谩s del limbo con una cuchilla est茅ril.
- Posteriormente se incubaron con colagenasa I. Durante la noche a 37 ° C en un ba帽o con agitaci贸n y al d铆a siguiente se colocaron en placas de cultivo p60 con el medio de mantenimiento de fibroblastos se le a帽adi贸 insulina, transferrina y selenio hasta que las c茅lulas alcanzaron los subcultivos de (f-LSC) se mantuvieron en el medio de expansi贸n
V铆a de administraci贸n: Se encuentra en ensayos y para determinar los resultados se lo realizo por cultivos con muestras de sangre de pacientes sanos y con tiroiditis autoinmune.
Resultados:
- A corto plazo, en 7 d铆as se empez贸 a detectar efectos inmunosupresores en donde fue capaz de prevenir la activaci贸n inapropiada de linfocitos T autorreactivos mediados por las f-LSC en pacientes con TH adem谩s se investig贸 la producci贸n de citocinas proinflamatorias o inmunosupresoras y la expresi贸n de los factores de transcripci贸n ROR-纬T. Los resultados mostraron que, en c茅lulas T activadas de pacientes con TH, la producci贸n intracelular de IFN-纬, IL-17A y ROR-纬T se redujo considerablemente.
domingo, 14 de febrero de 2021
Animal transg茅nico para el estudio de hipotiroidismo cong茅nito
El simportador Na/I (NIS) media el transporte de yoduro al interior de la c茅lula tiroidea, el primer paso en la bios铆ntesis de la hormona tiroidea (HT), mutaciones en el gen SLC5A5 (NIS) resulta en una prote铆na no funcional causante de hipotiroidismo cong茅nito, por un defecto en el transporte de I. En modelos de ratones NIS KO se identific贸 que una dieta con altas concentraciones de I rescat贸 parcialmente la bios铆ntesis de HT, y esto indica que existen otra v铆as distintas al NIS. (1)
- Tema del articulo: Un suministro de yoduro en la dieta extremadamente alto previene el hipotiroidismo severo en ratones knockout para el simportador de Na / I (gen SLC26A4)
- Tipo de animal transg茅nico: ratones NIS KO
- M茅todo por el cual fue obtenido:
- Se obtuvo c茅lulas madre embrionarias del repositorio del proyecto de rat贸n knockout, la selecci贸n de genes se utiliz贸 para modificar el gen Slc5a5 (NIS). Por recombinaci贸n hom贸loga, se insert贸 un casete con una se帽al poliA despu茅s del ex贸n 5, mientras que los exones 6 y 7 estaban flanqueados por sitios loxP y se obtuvo un alelo Slc5a5 TM1a. Este se inyect贸 en blastocistos para generar ratones quim茅ricos, que transmitieron el alelo Slc5a5 TM1a a su descendencia.
- Usos que se le a dado: Para probar la hip贸tesis de que las altas concentraciones de I en el plasma, que resultan de alto que la dieta, hacen posible que I pueda entrar en las c茅lulas foliculares tiroideas en ausencia de NIS. (1)
Ventajas y desventajas de los transg茅nicos
Ventajas
- Son muy 煤tiles en la creaci贸n de nuevos tipos de medicamentos para algunas enfermedades.
- La crianza y comercializaci贸n de animales transg茅nicos destaca ya que se trata de una carne con m谩s nutrientes y producen un tipo de carne m谩s s贸lida.
- Mejoran la investigaci贸n b谩sica, ya que facilitan un mayor entendimiento de los mecanismos de funcionamiento y control de los genes.
- Permiten modificar caracter铆sticas de productos alimenticios, como la leche, haci茅ndolos m谩s adecuados para el consumo humano o m谩s f谩cilmente transformables por la industria.
- Ventajas del uso de plantas transg茅nicas esta la disminuci贸n de las p茅rdidas de cultivo por plagas, y una disminuci贸n en el uso de plaguicidas. Mediante la Introducci贸n de genes de que producen la toxina cry, formando prote铆nas t贸xicas Bt, que las hacen resistentes a las principales plagas.(2)
Desventajas
- Al modificar especies ya existentes podemos poner en riesgo especies aut贸ctonas.
- Las reacciones al茅rgicas o hipersensibles en algunas personas que se podr铆an desencadenar como consecuencia de la presencia de genes de otras especies en las prote铆nas consumidas por los seres humanos al alimentarse
- El efecto t贸xico de los cristales de estas prote铆nas Cry pueden afectar a otros grupos de insectos no relacionados con las plantas de cultivo.
- A largo plazo el uso extensivo de agroqu铆micos que se da a estos cultivos puede ocasionar el surgimiento de s煤per plagas.
- La inserci贸n de material gen茅tico extra帽o a un genoma equilibrado y seleccionado durante millones de a帽os tiene como consecuencia la posible inestabilidad estructural y bioqu铆mica del genoma de la planta. (3)
domingo, 7 de febrero de 2021
ADN recombinante artificial en hipotiroidismo cong茅nito (HC)
- T: Identificaci贸n y caracterizaci贸n de nuevas mutaciones de PAX8 en hipotiroidismo cong茅nito
- O: Identificar y caracterizar las mutaciones de PAX8 en clones recombinantes
- G: PAX 8; La secuencia codificante completa se amplifico por RT-PCR
- ER: KpnI y XbaI
- EL: No especifica
- V: pCDNA3.1(pl谩smido);
- C R: C茅lulas eucariotas - c茅lulas HeLa
- M T G: Transfecci贸n por lipofecci贸n
- M I C:
- M茅todos moleculares:
- PCR, secuenciaci贸n
- M茅todos microbiol贸gicos:
- Cultivo de c茅lulas en DMEN suplementado con penicilina-estreptomicina
- Metidos bioqu铆micos:
- Movilidad electrofor茅tica (EMSA)
Recombinaci贸n de 谩cidos nucleicos en la naturaleza
Un ejemplo de recombinaci贸n de AN en la naturaleza sucede en las organismos unicelulares procariontes (bacterias), que consiste en la integraci贸n del ADN del donante en el cromosoma receptor mediante recombinaci贸n esto se da entre c茅lulas bacterianas y mediante de tres mecanismos:
- Conjugaci贸n: Proceso de transferencia g茅nica desde una c茅lula donadora a otra receptora, que se realiza por medio de los pl谩smidos, que es un tipo de ADN circular extracromosomal autoreplicante y se requiere de contacto directo entre genes.
- Transformaci贸n: en la que una bacteria incorpora segmentos de ADN de bacterias lisada
- Transducci贸n: Involucra la transferencia de segmentos de DNA de una bacteria a otra, pero mediada por virus bacterianos (bacteri贸fagos).(2)